植物发育生物学实验指导

来源:admin  浏览量:  更新时间:2017-05-04 10:16:30

内容简介

本书系统介绍了植物发育生物学研究的常规方法和技术,重点介绍了有关分子生物学研究方法和技术。涉及植物开花、传粉、受精、胚胎发育及植株形成等不同发育阶段的细胞和分子机理。该书可供高校有关专业作教材,也可供有关研究人员参考。

目录

实验室安全守则
第一部分 植物发育相关突变体和转基因植株的获得及初步分析
第一节 利用化学方法获得植物突变体及功能基因的克隆
实验一EMS诱变获得植物突变体库
实验二 图位克隆技术
实验三TILLING技术
第二节 利用农杆菌介导的植物转基因技术
实验四 农杆茵培养、感受态细胞准备和质粒转化
实验五 农杆菌介导的拟南芥转基因方法
实验六 农杆菌介导的烟草转基因方法
实验七 农杆菌介导的水稻转基因方法
第三节 拟南芥T-DNA插入突变体的获得和鉴定
实验八 拟南芥T-DNA插入突变体库的获得
实验九 拟南芥T-DNA插入突变体的筛选——植株表型分析和鉴定
实验十T-DNA插入位点基因的克隆和鉴定——Tail-PCR
实验十一T-DNA插入突变体纯合体的鉴定
实验十二T-DNA插入突变体的互补实验
第四节 多基因突变体的获得
实验十三 拟南芥杂交技术

第五节目的基因RNAi及过量表达转基因植株的获得
实验十四RNAi原理及基本步骤
实验十五过量表达的原理及基本步骤
实验十六拟南芥RNAi及过量表达转基因植株的获得
第二部分植物发育相关突变体及转基因植株的验证和分析
第一节转基因植株DNA水平的鉴定
实验十七PCR方法验证外源基因转入植株
实验十八Southern杂交验证转基因植株中外源基因的拷贝数
第二节转基因植株mRNA水平的鉴定
实验十九Northern杂交分析基因的表达
实验二十RT-PCR方法分析基因的表达
实验二十一Real-time PCR方法分析基因的表达
实验二十二mRNA原位杂交技术
第三节转基因植株蛋白质水平的鉴定
实验二十三转基因植株蛋白质水平的检测(Western blot)

实验二十四植物组织免疫酶和免疫荧光技术
第三部分生物信息学方法及其他常用分子生物学技术
第一节生物信息学方法
第二节启动子分析
实验二十五启动子序列的克隆——染色体步移法
实验二十六启动子和GUS融合转基因植株的染色分析
实验二十七DR5::GUS融合转基因植株的染色分析
第三节定点突变获得突变体的方法
实验二十八利用QuikChange Site-directed Mutagenesis试剂盒获得定点突变基因
第四节蛋白质亚细胞定位技术——基因枪法
实验二十九基因枪法转化洋葱表皮细胞
第五节DNA和蛋白质互作的研究方法
实验三十CHIP技术
第六节蛋白质相互作用的研究方法
实验三十一酵母双杂交技术
实验三十二免疫共沉淀技术
第四部分植物组织培养技术

实验三十三植物培养基的配制
实验三十四烟草无茵苗的培养
实验三十五水稻种子愈伤组织的培养和
幼苗的再生
第五部分植物发育生物学研究中常用的细胞学方法
实验三十六植物组织石蜡切片技术
实验三十七植物组织冰冻切片技术
实验三十八烟草小孢子发育过程的观察
实验三十九拟南芥花粉表型的分析
实验四十烟草大孢子发育过程的观察
实验四十一拟南芥胚珠透明技术——胚胎发育过程的观察
实验四十二烟草胚胎分离技术及胚胎发育过程的观察
缩写词
参考文献